血清使用和处理中的常见问题

　　血清使用和处理中的常见问题

　　1.保存血清的方法

　　建议血清应保存在-5℃至-2O℃。若存放于4℃时，请勿超过一个月。一次无法用完一瓶，建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。

　　2.如何解冻血清才不会使产品品质受损

　　将血清从冷冻箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室温下使之全融。但必须注意的是，融解过程中必须规则地摇晃均匀。

　　3.血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理

　　血清中沉淀物的出现有许多种原因，但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成，血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后，也会存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物，并不影响血清本身的品质。

　　欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞您的过滤膜。

　　4.为什么要热灭活血清

　　加热可以灭活补体系统。启动的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，启动淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究，培养ES细胞，昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。

　　5.有必要做热灭活吗

　　实验显示，经过正确处理的热灭活血清，对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进，或没有任何作用，甚至通常因为高温处理影响了血清的品质，而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清，沉淀物的形成会显著的增多，这些沉淀物在倒置显微镜下观察，如同“小黑点"，常常会让研究者误以为是血清遭受污染，而把血清放在37℃环境中，又会使此沉淀物更增多，使研究者误认为是微生物的分裂扩增。因此，除非必须，尽可能不需要做热处理这一步。

　　6.为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀

　　储存在2-8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。这应该不会影响血清的品质。建议在-20℃储存胎牛血清，避免反复冻融。

　　7.如何避免沉淀物的产生

　　解冻血清时，请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温)，若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃)，实验显示非常容易产生沉淀物。解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。  请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响血清的品质。血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。

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