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冻存管在使用前需注意哪些问题?

更新时间:2022-09-06    点击次数:1507

  冻存管在使用前需注意哪些问题?

 

  1、问:Nunc冻存管可以灭菌吗?

  答:虽然冻存管使用聚乙烯材料制造,但是我们不推荐客户灭菌。

  2、问:冻存管内旋盖和外旋盖有什么区别?

  答:内旋冻存管为气相液氮气相中冻存样品而设计,管口硅胶垫增强了冻存管的密封性;外旋冻存管为机械设备如冰箱中冻存样品而设计,外旋盖的螺纹盖可以降低处理样品时的污染几率。

  3、问:Nunc的冻存管可以浸入液氮(液相)中冻存样品吗?

  答:Nunc的内旋冻存管可以在液氮中储存,由于硅胶垫增强密封性。但超低温度下,任何的密封材料都变得异常脆弱,理论上只要是机械密封就存在泄漏的危险,为了防止泄漏产品的危险,机械密封的冻存管必须密封在保护袋中。Nunc提供CryoFlex 密封管,热密封的聚乙烯管专门为Nunc冻存管密封设计。将冻存管在液氮液相中冻存而没有使用CryoFlex 密封管是十分危险的,冻存管在液氮液相中冻存必须使用CryoFlex 密封管进行热密封。

  警告:不要使用Nunc的冻存管在液氮液相冻存样品,除非正确的将冻存管密封在Nunc CryoFlex Tubing (Cat. No. 343958)中。若不正确使用冻存管,液氮会进入冻存管中导致压力上升,发生爆炸或者生物泄漏安全事故。正确使用方法可以参考Nalge Nunc International Cryopreservation Manual。

  4、问:当冻存管储存在液氮液相中而没有使用CryoFlex Tubing 时,如何正确的溶解复苏细胞?

  答:在整个操作过程中必须穿戴保护服,包括手套,脸罩等。

  冻存管从液氮液相取出后必须在液氮气相中储存24h,这样可以使得液氮从冻存管中慢慢的蒸发和逃逸,从而降低冻存管中的压力。等在液氮气相储存24h后,将冻存管放入水浴槽,同时用毛巾覆盖,等熔融复苏结束后转移冻存物。

  5、问:使用CryoFlex 密封管时需要热密封,这会不会影响细胞活性?

  答:将样品加入冻存管以前需要将冻存管置于4℃ 冰浴槽。热密封CryoFlex 密封管时,冻存管内温度的升高水平不足以破坏细胞活性。这个阶段需要加入冻存保护剂。

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