ELISA试剂盒介绍和操作步骤

　　ELISA中有三个必要的试剂：免疫吸附剂、结合物和酶的底物等

　　完整的ELISA试剂盒包含以下各组分：

　　1.已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂)

　　2.酶标记的抗原或抗体(结合物);

　　3.酶的底物;

　　4.阴性对照品和阳性对照品(定性测定中)，参考标准品和控制血清(定量测定中);

　　5.结合物及标本的稀释液;

　　6.洗涤液

　　7.酶反应终止液。

　　ELISA试剂盒操作步骤：

　　1. 加标准品：在酶标包被板上设标准品孔，依次加入不同浓度的标准品50ul(建议每个浓度做2个平行孔)

　　2. 加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品40μl，然后再加样品亲和素10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

　　3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

　　4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

　　5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

　　6. 加酶：除空白孔外每孔加入酶标试剂50μl。

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