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ELISA实验结果白板且阳性对照不显色原因是?
ELISA试剂盒实验结果白板,而且阳性对照不显色,常见原因如下:
a)可能原因:漏加或者误加试剂;
解决方法:检查试验记录和剩余试剂。每次加液前均应核对标签。
b)可能原因:试剂过期;
解决方法:使用有效期内的产品。
c)可能原因:洗板液配制中出现问题,如量筒不干净含HRP酶抑制物;
解决方法:使用干净的器皿,正确配制试剂。
d)可能原因:温育的时间或温度不够;
解决方法:校正温育箱温度。
e)可能原因:标准品失活或者丢失;
解决方法:标准品正确保存、溶解和混匀。
f)可能原因:抗体失活或者丢失;
解决方法:更换抗体或者提高抗体浓度
g)可能原因:酶失活或者丢失
检查方法:把工作浓度的酶再稀释20-100倍,取5uL加入50ul的显色底物,终止后显色是否能达到1.0左右,此为酶的粗略估计。
解决方法:更换酶或者提高酶的浓度。
h)可能原因:显色底物失活
检查方法:加少量的工作浓度的酶,TMB是否很快显色。
解决办法:更换显色底物。
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