九游代理知识分享：人γ干扰素(IFN-γ)elisa试剂盒样本的收集和保存

　　九游代理知识分享：人γ干扰素(IFN-γ)elisa试剂盒样本的收集和保存

　　γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)是水溶性二聚体细胞因子 。是II型干扰素的成员。*初叫巨噬细胞活化因子。中文名 γ干扰素 外文名 Interferon-γ,IFN-γ 归 类II型干扰素 原 名巨噬细胞活化因子。γ-干扰素具有抗病毒、免疫调节及抗肿瘤特性。可以与结合到γ-干扰素受体(IFNGR)，γ-干扰素受体(由两个亚基组成。γ-干扰素结合并激活其受体调节JAK-STAT通路。γ-干扰素激活抗原提呈细胞，通过上调转录因子T-bet而促进I型辅助T细胞(Th1细胞)的分化。γ-干扰素是I型辅助T细胞(Th1细胞)的标志性的细胞因子。II型辅助T细胞(Th2细胞)释放白细胞介素-4 (IL-4) 和白细胞介素-13 (IL-13)。自然杀伤细胞和CD8T细胞也产生γ-干扰素。γ-干扰素通过迅速降解RANK-RANKL信号通路的TRAF6而抑制破骨细胞形成。

　　标本的采集和保存

　　ELISA试验所用标本主要为血清，也可以用经过预处理的唾液、尿液、粪便等生物材料。患者标本可能含有干扰试验的免疫物质，导致假阳性或者假阴性的结果，干扰因素一般可分为两类，即内源性和外源性干扰因素。内源性干扰因素包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异性免疫球蛋白等，避免内源性干扰因素主要通过选择合理的试剂。外源性干扰因素包括标本溶血、标本被细菌污染、储存时间过长及标本凝固等。在血液采集和运输过程时，应注意避免溶血。否则，红细胞溶解时会释放出血红蛋白，血红蛋白中的亚铁血红素具有过氧化物酶活性的物质，在以HRP为标记的ELISA试验测定中，可能会增加非特异性显色而出现假阳性结果。血清标本适宜在新鲜时检测，若推迟检测需将标本低温保存。一般说来，在7天内检测的血清标本，可放置于2℃~8℃保存，超过1周检测的需低温冰存。因反复冰融会使抗体效价降低，所以，对需要保存做多次抗体测定的血清标本，应少量分装并冰存。血清标本应充分离心，否则可因残留的纤维蛋白原非特异吸附于微孔而造成假阳性结果。

　　加样操作中，依次有3次加样，即加标本、加酶结合物、加底物。加标本一般采用手工加样或者加样器。手工加样每次必须更换吸嘴，以避免交叉感染。要掌握好并在实际操作中揣摩使用技巧，避免吸样量过多或过少。加样器在长时间使用时会因机械磨损或推动杆内附着的血痂等原因造成加样不准，因此必须定期对加样器进行维护和校准。加酶结合物和底物一般可直接滴加。每次加样时，应将所加物置于ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，注意不可溅出，不能产生气泡，加酶试剂后要用吸水纸在酶标板上轻轻擦拭吸干。加底物操作时应注意各试剂盒显色剂不能混用，添加顺序不能颠倒，不能溅出孔外。标本较多时，需要分批操作，以免加样板过多，造成加样后放入孵箱前等待时间过长(尤其是在室温较高时)。*后，在微型振荡器上震荡lmin，以保证混匀。

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