干货分享：如何提高ELISA的重现性?

　　如何提高ELISA的重现性?

　　免疫检测法的性表现为单次实验孔间(批内)的重复性和多次实验之间(批间)的重复性。CV值高则表明度低，通常由以下两个原因造成：移液技术和洗涤技术。

　　移液技术

　　1. 移液时，枪头应对准孔中央，避免接触孔壁及底部。

　　2. 移液后轻轻晃动混匀试剂。

　　3. 如果您的样品具有黏性，请预先润洗枪头以消除表面张力的影响。吸液时等待片刻使体积平衡后再取出。

　　4. 移液不充分或移液体积不均，说明移液器需要校正。必要时请检查移液器并重新校正。

　　5. 加样时，不同的试剂标准品和样本间都要确保更换枪头，避免交叉污染。

　　6. 确保使用合适的枪头。不合适的枪头无法正确量取吸液和加样的体积。

　　洗涤技术

　　1. 如果使用自动洗板机或多通道移液器，请确保进出口能正常运作。

　　2. zui后一次洗涤后，翻转酶标板倒出多余的洗涤液，并在吸水纸上拍干液体。洗板太快或太慢都会降低度。不能让孔内液体自然风干，需立即进行下一步操作。

　　3. 按照说明书，添加足量的洗涤液至孔内，并保证洗涤。

　　4. 由于洗涤液不是通用的，当试剂盒内的洗涤液用完时，请不要使用其他试剂盒中的洗涤液。如有需要，可联系技术支持寻求帮助。

　　5. 不要减少洗涤时的浸泡时间或跳过浸泡的步骤。

　　6. 按照说明书上推荐的洗涤次数清洗，随意改变洗涤次数会影响实验的准确性。

　　贮液瓶

　　为避免污染，不同的试剂使用不同的贮液瓶。一些试剂或样本很容易被污染(比如唾液、氧化剂等)，请参考说明书操作。必要时候采取一些预防措施保护溶液。

　　封板覆膜

　　使用过的封板覆膜可能含有上一步实验残留的试剂，如果重复使用会造成孔板污染。建议每一次孵育使用新的封板覆膜。

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